专题1 .1.2 基因工程的基本操作程序
1、基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：_________________________、_____________________、_________________________、_____________________________。
2、目的基因的获取
目的基因可以从____________________________，也可以用_________________。目的基因主要是指____________________，也可以是一些____________________________。 获取目的基因的方法有以下几种：________________________、_____________________ __________、______________________________________。
3、基因表达载体的构建
基因工程的核心是___________________。一个基因表达载体的组成除了________外，还必须有______、______以及________等。
4、将目的基因导入受体细胞
转化是指___________________________________________________________。
将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是______________，除此之外，还有________和______________等方法。 ______________是转基因动物中采用最多，也是最为有效的一种将目的基因导入动物细胞的方法。大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：首先用_______处理细胞，使细胞处于一种___________________________________的生理状态，这种细胞称为__________。
5、目的基因的检测与鉴定
要检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了目的基因，非常关键，检测方法是_______________________。以__________________________________________作为探针。要检测目的基因是否转录出了mRNA，检测方法是___________。检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是______________。除了上述分子检测外，有的还需要进行____________________的鉴定。
1、目的基因的获取
思考并回答：
（1）目的基因的获取方法有哪些？
（2）为什么要建立基因文库？怎么建立的？
（3）如何从基因文库中获取目的基因？
（4）为什么要建立cDNA文库？如何获取cDNA？
（5）PCR技术的原理是什么？
（6）如何获取引物？
（7）PCR技术扩增的过程是？
2、基因表达载体的构建
思考并回答：
（1）为什么要构建基因表达载体？单独的DNA片段能不能稳定遗传？
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