乙酰化滤纸层析荧光分光光度法
1 主题内容与适用范围
本方法规定了测定水质中苯并(a)花[以下简称B(a)P]的方法。
本标准适用于饮用水、地面水、生活污水、工业废水。最低校出浓度为0.004μg/L。
注意:B(a)P是一种由五个环构成的多环芳烃,它是多环芳烃类的强致癌代表物。基于B(a)P的强致癌性,按本标准方法分析时必须戴抗有机溶剂的手套,操作应在白搪瓷盘中进行(如溶液转移、定容、点样等)。室内应避免阳光直接照射,通风良好。
2 原理
水中多环芳烃及环已烷可溶物经环己烷萃取(水样必须充分摇匀),萃取液用无水硫酸钠脱水、浓缩,而后经乙酰化滤纸分离。分离后的B(a)P用荧光分光光度计测定。
3 试剂
除另有说明外,分析时均使用分析纯试剂和蒸馏水。
3.1 B(a)P标准溶液的配制:称取5.00mg固体标准B(a)P于50mL容量瓶中[因B(a)P是强致癌物,为了减少污染,以少转移为好],用少量苯溶解后,加环已烷至标线,其浓度为100?g/mL。特此贮备液用环己烷稀释成10?g/mL的标准使用液,避光贮于冰箱中。
3.2 乙酷化滤纸的制备:把15×30cm的层析滤纸15至20张卷成高15cm的圆筒状,逐张放入1000mL高型烧杯中,杯壁与靠杯的第一张纸间插入一根玻璃棒,杯中间放一枚玻璃熔封的电磁搅拌铁芯。在通风柜中,沿杯壁慢慢倒入乙酰化剂(由苯十乙酸酐+浓硫酸=750mL+250mL+0.5mL混合配制成),磁力恒温搅拌器的温度保持55±1℃.连续反应6h。取出乙酰化滤纸,用自来水漂洗3~4次,再用蒸馏水漂洗2~3次,晾干。次日用无水乙醇浸泡4h后,取出乙酰化滤纸,晾干压平,备用。
3.3 环己烷,重蒸。用荧光分光光度计检查:在荧光激发波长367nm,狭缝10nm;荧光发射狭缝2nm,波长405nm应无峰出现。
3.4 丙酮,重蒸。
3.5 甲醇。
3.6 乙醚。
3.7 苯,重蒸。
3.8 乙酸酐。
3.9 硫酸,P=1.84g/mL。
3.10 无水硫酸钠。3.11 二甲基亚矾(DMSO):用前先用环已烷萃取两次(500mL二甲基亚矾加50mL环已烷萃取)。弃去环己烷后备用。
4 仪器
常用实验室设备和下列仪器。
4.1 备有紫外激发和荧光分光的荧光分光光度计,光程为10mm的石英比色皿。
4.2 紫外分析仪(带365nm或254nm的滤光片)。
4.3 康氏振荡器。
4.4 磁力恒温搅拌器。
4.5 立式离心机,转速为4000r/min。
4.6 分液漏斗,1L、3L、100mL。活塞上禁用油性润滑剂,活塞直接用水或有机溶剂润滑即可。
4.7 锥形瓶,250mL。具磨口玻璃塞。
4.8 恒温水浴锅。
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