补充题

 

1. 为什么温型自身免疫溶血性贫血患者在鉴定抗体时需要用到吸收试验?

患者血清中存在的温型自身抗体可能掩盖具有临床意义的同种异体抗体,用自身红细胞吸收除去这类温自身抗体,可能使血清中同种异体抗体被检测出来。然而,在血液循环中自身红细胞致敏了自身温抗体,所以需用吸收放散方法先将自身抗体解离下来,进一步吸收除去血清中游离的自身抗体,至此才可鉴定血清中同种抗体。

2. 为什么在温自身抗体中用酶处理红细胞可以加速吸收自身抗体?

在血液循环中自身红细胞吸收的温自身抗体能够从红细胞膜上被解离,只有暴露出的抗原才能吸收除去血清中游离的自身抗体。酶处理红细胞可以加速吸收过程。最有效的方法是使用二硫苏糖醇和木瓜酶(ZZAP)试剂。IgG分子经巯基试剂处理后增加对蛋白酶消化的敏感性。当被IgG致敏的红细胞用ZZAP试剂处理后,IgG分子失去其完整性,并从红细胞膜上解离下来,蛋白酶的作用可增减加处理后红细胞的吸收能力。

3. 为什么ZZAP处理红细胞有一定局限性?使用时有哪些注意事项?

ZZAP处理红细胞时,也可破坏所有Kell系统抗原和其他能被蛋白酶破坏的血型抗原,包括M、N、Fya、Fyb、S、s抗原以及LW、Gerbich、Cartwright、Domgbrock和Knops系统抗原。如果怀疑自身抗体的特异性属于这些血型系统中的任何一种,就必须换用其他自身吸收程序如只用1%半胱氨酸激活木瓜酶或1%无花果酶处理的自身红细胞。 在用ZZAP处理红细胞前,不必洗涤红细胞;ZZAP处理的红细胞与血清混合,尤其强抗体存在时,红细胞会出现凝集,说明吸收效果好。如果同种抗体非常强,应先将用于吸收的细胞分成3份甚至更多。如果第一次吸收没有成功使用较高比例的细胞/血清{放散液}可以增加吸收效果。吸收用的压积红细胞应尽可能去除上清液以免稀释血清中或放散液中抗体。孵育时要轻轻摇动试管以争取最大表面接触如果吸收对自身抗体没有效果,可以试用没有经过处理的红细胞进行吸收。超过4次吸收可能减弱自身抗体反应。

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