2012届高三三轮复习生物基础知识考前最后梳理（5）
三、多聚酶链式反应扩增DNA片段
1．PCR：多聚酶链式反应的简称，是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它能以极少量的DNA为模板，在几小时内复制出上百万份的DNA拷贝。
2．扩增方向：总是从子链的5′端向3′端延伸。
3．需要引物的原因：DNA聚合酶不能从头合成DNA，而只能从引物3′端延伸DNA链，因此DNA复制需要引物。
4．原理：热变性原理，
5．条件：DNA模板，分别与两条模板链相结合的两种引物，脱氧核苷酸，耐热的Taq DNA聚合酶，同时控制温度。
6．过程：变性（高温 94℃）、复性（低温55℃）、延伸（中温72℃）
7．结果：DNA聚合酶只能特异地复制处于两引物之间的DNA序列，使这段固定长度的序列呈指数扩增。
四、血红蛋白的提取和分离
1、实验原理：利用蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力，分离不同种类的蛋白质。
2、凝胶色谱法原理：根据相对分子质量的大小分离蛋白质的有效方法。相对分子质量小的分子要穿过多孔凝胶颗粒的内部通道，路程长，流动慢；相对分子质量大的分子直接通过凝胶颗粒的间隙，路程短，流动快。
第十单元现代生物科技
一、基因工程
1. 基因工程的诞生
（1）基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外 DNA 重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
（2）基因工程诞生的理论基础是在生物化学、分子生物学和微生物学科的基础上发展起来，技术支持有基因转移载体的发现、工具酶的发现，DNA 合成和测序仪技术的发明等。
2..基因工程的原理及技术
(3)基因工程操作中用到了限制酶、DNA 连接酶、运载体
考点限制酶细化：
限制酶主要从原核生物生物中分离纯化出来，这种酶在原核生物中的作用是识别 DNA 分子的特定核苷酸序列，并且使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。
①限制酶的特性是识别特定核苷酸序列，切割特定切点。限制酶产生的末端有两种：粘性末端和平末端。
② DNA 连接酶与 DNA 聚合酶的作用部位是磷酸二酯键，二者在作用上的区别为前者是恢复被限制性内切酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，后者单个的核苷酸连接到DNA分子上。
③作为基因工程的载体应该具备标记基因、多个限制性内切酶切点、能够在宿主细胞内复制和稳定存等特点。
⑤常见的载体种类有质粒、动植物病毒、噬菌体
（4）基因工程四步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测和表达。
考点细化：
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